使用新鮮潔凈的水與乙腈。沖洗系統(tǒng),確保系統(tǒng)干凈,不含任何緩沖鹽和污染物。
取用c8反相液相色譜柱時(shí)避免磕碰掉落。
將c8反相液相色譜柱入口端連接到系統(tǒng)上,柱出口端先不要連接,色譜柱身上有箭頭標(biāo)明正確流向。
在0.1 mL/min流速條件下用純乙腈潤(rùn)洗色譜柱,然后在2分鐘內(nèi)將流速升至0.5 mL/min。
當(dāng)溶劑均勻的從柱出口端流出,停流速,將c8反相液相色譜柱出口端接到系統(tǒng)檢測(cè)器上(這樣可以避免氣泡進(jìn)入檢測(cè)系統(tǒng),并且可快速達(dá)到基線平衡)。
重啟流速,按照步驟4的方法逐漸提高流速,至常規(guī)分析時(shí)所使用的流速。
參考柱效測(cè)試報(bào)告中的方法,使用該流動(dòng)相條件平衡色譜柱,通常需要使用5-10倍柱體積的流動(dòng)相,直至壓力與基線穩(wěn)定。
測(cè)試柱效。如果沒(méi)有柱效測(cè)試報(bào)告中的分析物,請(qǐng)沃特世化學(xué)消耗品部門(mén)尋求支持,使用合適的濃度與進(jìn)樣量。柱效結(jié)果略低于柱效測(cè)試報(bào)告屬正常情況。如結(jié)果明顯偏低、峰形拖尾,提示c8反相液相色譜柱和/或所使用的液相系統(tǒng)處于非理想狀態(tài),需要進(jìn)行故障排查。