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共創(chuàng)共贏
目前檢測黃曲霉毒素主要有薄層色譜法(TLC)、免疫親和柱-液相色譜法(HPLC-FL)、酶聯(lián)免疫法(ELISA)、免疫親和柱-液相色譜法串聯(lián)質(zhì)譜法等,薄層色譜法和酶聯(lián)免疫法主要應(yīng)用黃曲霉毒素的定性,不能準(zhǔn)確定量,免疫親和柱-液相色譜法和液相色譜法-串聯(lián)質(zhì)譜能夠準(zhǔn)確定量,但是由于免疫親和柱與質(zhì)譜檢測成本高,應(yīng)用范圍受到限制。
迪馬科技開發(fā)的糧谷中黃曲霉毒素的測定采用檢測成本較低的固相萃取-液相色譜法,對比國標(biāo)方法《GB/T 18979-2003 食品中黃曲霉毒素的測定 免疫親和層析凈化液相色譜法和熒光光度法》,本方案具有以下優(yōu)勢:
方法優(yōu)勢
前處理步驟簡單,樣品經(jīng)有機(jī)溶劑提取后,直接上樣固相萃取柱,收集流出液后進(jìn)行色譜分析,方法具有回收率高、穩(wěn)定性好、凈化效果優(yōu)異等特點;
避免了免疫親和柱容易受環(huán)境影響而引起黃曲霉毒素回收率低和凈化效果不好的弊端,保證了實驗結(jié)果的重現(xiàn)性和準(zhǔn)確性;
過柱方法簡單易操作,無需固相萃取柱活化、淋洗、洗脫步驟,上樣后直接收集流出液進(jìn)行色譜分析,一步即可完成凈化,對操作人員要求不高,檢測成本相對較低,能被很多企事業(yè)單位采用;
可同時檢測黃曲霉毒素M1、G1、B1、G2、B2,并能夠達(dá)到準(zhǔn)確定性定量,檢出限是0.05 μg/kg,遠(yuǎn)低于國家標(biāo)準(zhǔn)《GB 2761-2011 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中真菌毒素*》。
ProElut AFT-3柱優(yōu)勢
ProElut AFT-3柱由兩種吸附劑按照一定的比例分層填裝而成,采用不同作用機(jī)理去除雜質(zhì),同時對黃曲霉毒素沒有不可逆吸附,保證了樣品的凈化效果及回收率;
本產(chǎn)品是商品化的成品柱,吸附劑穩(wěn)定性好,不受外界環(huán)境因素影響,保證實驗結(jié)果的重現(xiàn)性和準(zhǔn)確性;
過柱過程操作步驟簡單,節(jié)省時間,提高工作效率。
以下為詳細(xì)解決方案,敬請參考!
1、適用范圍
本方案適用于玉米面和花生中黃曲霉毒素M1、G1、B1、G2、B2的檢測,方法檢出限是0.05 μg /kg。
2、樣品準(zhǔn)備
稱取2.0 g樣品,加入8 mL 85%乙腈水,振蕩2 min,超聲10 min,6000 rpm離心2 min,收集上清液,待凈化。
3、SPE柱凈化——ProElut AFT-3 12 mL(Cat.#:65915)
將待凈化液加入柱中,收集2 mL流出液,在50 ℃水浴下減壓蒸干。
4、衍生
依次加入0.5 mL正己烷和0.5 mL TFA,旋好玻璃塞充分混勻衍生液,45℃靜置10 min,吹干衍生液,用10%乙腈水定容至1 mL。
5、分析條件
色譜柱: Diamonsil C18(2),250 × 4.6 mm,5 μm(Cat.#:99603)
流 速: 1.0 mL/min
檢測器:* 熒光檢測器,Ex:365 nm;Em:435 nm
柱 溫: 30℃
進(jìn)樣量: 20 μL
流動相: A:水 B:異丙醇+乙腈=3+2
梯度
6、添加回收結(jié)果
6.1 玉米面中黃曲霉毒素添加回收結(jié)果
6.2 花生中黃曲霉毒素添加回收結(jié)果
黃曲霉毒素檢測相關(guān)產(chǎn)品信息(現(xiàn)貨):
紅色產(chǎn)品貨號#30039、#30040、#1034、#1035*
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