HILIC色譜柱是一種用米政善在反相色譜中保存較差的強極性物質保存行為的色譜技術。它通過采用強極性同定性,并且結倉高比例有機相/低比例水相組成的流動相來實現(xiàn)這一目的。而這樣的流動相組成尤其有利于提高電噴霧離子化質譜的靈敏度。它的固定相是親水的,并且通常在一定pH范圍內是帶電荷的。親水性越強的化合物,被保留的時間越長。
HILIC色譜柱的產品特點:
●采用鍵合了氨基甲酰官能團的硅膠填料作為固定相,特別適合親水性化合物的分離;
●具有優(yōu)異的化學穩(wěn)定性,而且對于中小分子的極性化合物有很好的保留性;
●在含水有機流動相中更為穩(wěn)定;
●適合針對水溶性極性化合物進行LC/MS的分析。
HILIC色譜柱流動相需要注意的問題:
1、流動相中總是至少保持極性溶劑,這保證HILIC硅膠填料始終被水浸潤;
2、在流動相或梯度中至少保持有機溶劑的比例不低于40%;
3、不要使用磷酸鹽緩沖溶液體系,因為磷酸鹽緩沖液在HILIC色譜模式下會析出;
4、緩沖系統(tǒng)如甲酸銨或乙酸銨水溶液比甲酸或乙酸的水溶液有重現(xiàn)性更好的結果。如果不能使用緩沖液而一定要使用流動相添加劑如甲酸,使用0。2%的濃度而非0。1%;
5、為得到較好的峰形,在流動相或梯度中總是保持緩沖系統(tǒng)的濃度。